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病原监控专题丨susMDCK悬浮细胞分离流感病毒:与繁重工作说拜拜

流感监控网络实验室常用MDCK细胞系来进行季节性流感病毒的分离

2022-02-21

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流感监控网络实验室常用MDCK细胞系来进行季节性流感病毒的分离,该细胞系是由Madin和Darby在1958年从美国Cocker Spaniel母曲架犬的肾脏组织分离培育出的,通常是以贴壁方式生长的上皮样细胞。由于其病毒感染效率高,增值快,且不易变异,MDCK细胞系广泛应用于多种病毒的分离培养,常被用于疫苗生产。

传统的MDCK细胞系培养,采用有血清的贴壁细胞培养方式。然而血清成分复杂,含有对细胞有害的成分,后期产物分离纯化难度大。另外,血清来源有限,价格昂贵,生产成本高;而且血清的质量因动物个体、血清产地、生产批号不同而产生波动,使得实验和生产难以实现标准化。


通过对传统MDCK细胞的无血清培养驯化,加上高表达的表面受体——α-2,6Gal Sa受体蛋白,可以使该细胞系与流感病毒表面HA基因更好地结合,达到高效分离流感病毒的目的。目前,悬浮细胞分离病毒已广泛被使用。susMDCK悬浮细胞生长不依赖支持物表面,由于缺乏粘附分子的表达,在培养基中便自然呈现悬浮状态。因此在细胞培养与传代时,使用无血清培养液,并且只需要直接稀释或离心稀释,无需胰酶消化。相较于传统MDCK贴壁细胞具有操作简便,分离率高,分离周期短的优势。


sus-MDCK悬浮细胞

分离病毒的优势

操作便捷

细胞传代——只需稀释,无需胰酶消化,且无需牛血清,使用susMDCK悬浮细胞专用的M-SUS培养液即可;


标本接种——无需洗涤细胞,无病毒吸附过程,直接加入标本培养;


病毒收获和鉴定——随时可取出进行血凝试验,若滴度小于8,则可以继续培养,直到滴度满足要求。


效果显著

悬浮的susMDCK细胞通过增加病毒吸附表面积和流感病毒的受体,提高了吸附病毒的能力。对H1N1pdm09亚型和乙型流感病毒,尤其是对近年来因基因位点发生变异导致很难分离的季节性H3亚型流感病毒,分离培养的优势十分显著(如图1)。


另外,与贴壁细胞相比可以显著提高病毒分离培养的阳性率和病毒滴度(如图2)。


图1 H3N2悬浮细胞培养物的血凝实验结果


图2 两种类型细胞对随机样本

分离培养阳性率的比较


设备简单
只需培养箱、摇床和计数仪。



高效分离流感病毒的

susMDCK悬浮细胞产品


为了更好的服务于流感病毒分离培养工作,上海伯杰医疗科技有限公司精心定制了不同的悬浮细胞产品,以满足您的全方位需求!


方案一:流感病毒高效细胞分离培养试剂盒

一套囊括悬浮细胞培养所需仪器、试剂及耗材的实验包



方案二:susMDCK悬浮细胞成品管

无需试剂耗材,可直接进行病毒分离培养。




伯杰流感监测方案
多重荧光PCR筛查

回顾“病原监控专题丨甲型流感100多种病毒快速检测方案”,伯杰拥有一支从事病原体检测工作多年的专业技术团队,并有强大的流感病毒基因数据库的支持。


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流感常规检测多重组合方案


分型和全基因组测序服务

我公司构建的病毒一代测序平台,可开展季节性流感病毒四种亚型及禽流感病毒三种亚型的单个基因或全基因组一代测序。其它亚型流感病毒可提供定制测序服务。我公司现有illumina二代测序平台,可实现对所有A型和B型流感病毒的全基因组测序。


除测序外,您还可以选择我公司提供的序列分析服务,实现流感病毒HA基因进化分析和抗原位点分析、NA基因耐药位点分析以及其他基因关键位点分析等。数据挖掘要专业分析,伯杰贴心为你提供增值服务,可为您提供一对一的量身定制数据分析服务。



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上海伯杰医疗科技有限公司是一家致力于感染性病原体分子诊断试剂研发和应用,深耕于多重荧光PCR诊断试剂和痕量病毒二代测序试剂及相关服务的国家高新技术企业。公司围绕感染性病原体这一主线,从诊断试剂、诊断仪器、测序服务和医检所服务等多个面提供全套解决方案。公司秉承“勇于创新,质量为先”的方针,为医疗机构、疾控公卫、高校科研等合作伙伴提供优质产品与服务。

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